Kit RNAclean

A-1 Lisis sel atau homogenisasi tidak mencukupi

---- Mengurangkan penggunaan sampel, meningkatkan jumlah buffer lisis, meningkatkan homogenisasi dan masa lisis.

A-2 Jumlah sampel terlalu besar

---- Kurangkan jumlah sampel yang digunakan atau tingkatkan jumlah lysis buffer.

A-1 Lisis sel atau homogenisasi tidak mencukupi

---- Mengurangkan penggunaan sampel, meningkatkan jumlah buffer lisis, meningkatkan homogenisasi dan masa lisis.

A-2 Jumlah sampel terlalu besar

---- Sila lihat kapasiti pemprosesan maksimum.

A-3 RNA tidak dielusi sepenuhnya dari lajur

---- Setelah menambahkan air Bebas RNase, biarkan selama beberapa minit sebelum disentrifugasi.

A-4 Etanol dalam eluen

---- Setelah dibilas, sentrifus lagi dan keluarkan penyangga pencuci sebanyak mungkin.

Medium kultur sel A-5 tidak dikeluarkan sepenuhnya

---- Ketika mengumpulkan sel, pastikan untuk membuang media kultur sebanyak mungkin.

A-6 Sel yang disimpan di RNAstore tidak disentrifugasi dengan berkesan

---- Ketumpatan kedai RNA lebih besar daripada medium kultur sel purata; jadi daya empar harus ditingkatkan. Sebaiknya sentrifugal pada 3000x g.

A-7 RNA kandungan dan kelimpahan yang rendah dalam sampel

---- Gunakan sampel positif untuk menentukan apakah hasil rendah disebabkan oleh sampel.

A-1 Bahannya tidak segar

---- Tisu segar harus disimpan dalam nitrogen cair dengan segera atau segera dimasukkan ke dalam reagen kedai RNA untuk memastikan kesan pengekstrakan.

A-2 Jumlah sampel terlalu besar

---- Kurangkan jumlah sampel.

A-3 RNase cemarn

---- Walaupun penyangga yang disediakan dalam kit tidak mengandungi RNase, mudah mencemari RNase semasa proses pengekstrakan dan harus ditangani dengan hati-hati.

Pencemaran elektroforesis A-4

---- Ganti penyangga elektroforesis dan pastikan bahan habis pakai dan Loading Buffer bebas dari pencemaran RNase.

A-5 Terlalu banyak memuatkan elektroforesis

---- Mengurangkan jumlah pemuatan sampel, pemuatan setiap telaga tidak boleh melebihi 2 μg.

A-1 Jumlah sampel terlalu besar

---- Kurangkan jumlah sampel.

A-2 Beberapa sampel mempunyai kandungan DNA yang tinggi dan dapat diobati dengan DNase.

---- Lakukan rawatan DNase Bebas RNase ke larutan RNA yang diperoleh, dan RNA dapat langsung digunakan untuk eksperimen berikutnya setelah perawatan, atau dapat dimurnikan lebih lanjut dengan alat pemurnian RNA.

Untuk peralatan kaca, bakar pada suhu 150 ° C selama 4 jam. Untuk bekas plastik, rendam NaOH 0,5 M selama 10 minit, kemudian bilas dengan air bebas RNase dan kemudian sterilkan untuk mengeluarkan RNase sepenuhnya. Reagen atau larutan yang digunakan dalam eksperimen, terutama air, mestilah bebas dari RNase. Gunakan air bebas RNase untuk semua persiapan reagen (tambahkan air ke botol kaca bersih, tambahkan DEPC hingga kepekatan akhir 0.1% (V / V), goncangkan semalaman dan autoklaf).