Kit DNA Genomik Bakteria TGuide

A-1 Kepekatan sel atau virus yang rendah dalam sampel awal - Memperkaya kepekatan sel atau virus.

A-2 Lisis sampel tidak mencukupi - Sampel belum dicampurkan secara menyeluruh dengan buffer lisis. Sebaiknya campurkan secara menyeluruh dengan pulse-vortexing selama 1-2 kali. Lisis sel yang tidak mencukupi disebabkan oleh penurunan aktiviti proteinase K. Dianjurkan untuk memotong tisu menjadi kepingan kecil dan memanjangkan masa mandi untuk membuang semua residu di lysate.

A-3 Penjerapan DNA tidak mencukupi. - Tidak ada etanol atau peratusan rendah dan bukan etanol 100% ditambahkan sebelum lisat dipindahkan ke lajur putaran.

A-4 Nilai pH penyangga elusi terlalu rendah. - Sesuaikan pH antara 8.0-8.3.

Etanol sisa dalam eluen.

—Ada sisa penyangga pencuci PW dalam eluen. Etanol dapat dikeluarkan dengan menyentrifkan lajur putaran selama 3-5 minit, dan kemudian meletakkan pada suhu bilik atau inkubator 50 for selama 1-2 minit.

A-1 Sampelnya tidak segar. - Ekstrak DNA sampel positif sebagai kawalan untuk menentukan sama ada DNA dalam sampel telah menurun.

A-2 Pra-rawatan yang tidak betul. - Disebabkan oleh pengisaran nitrogen cair yang berlebihan, kelembapan kembali, atau jumlah sampel yang terlalu banyak.

Pra rawatan harus berbeza-beza untuk sampel yang berbeza. Untuk sampel tanaman, pastikan menggiling nitrogen cair dengan teliti. Untuk sampel haiwan, homogenate atau kisar dengan nitrogen cair. Untuk sampel dengan dinding sel yang sukar dipecahkan, seperti bakteria dan ragi G +, disarankan menggunakan kaedah lisozim, litikase atau mekanikal untuk memecahkan dinding sel.

4992201/4992202 Kit DNA Genomik menggunakan kaedah berasaskan lajur yang memerlukan kloroform untuk pengekstrakan. Ia sangat sesuai untuk pelbagai sampel tanaman, serta serbuk kering tumbuhan. Hi-DNAsecure Plant Kit juga berasaskan lajur, tetapi tanpa memerlukan pengekstrakan fenol / kloroform, menjadikannya selamat dan tidak beracun. Ia sesuai untuk tanaman dengan kandungan polisakarida dan kandungan polifenol yang tinggi. 4992709/4992710 DNAquick Plant System menggunakan kaedah berasaskan cecair. Pengambilan fenol / kloroform juga tidak diperlukan. Prosedur pemurnian adalah sederhana dan cepat tanpa had jumlah permulaan sampel, sehingga pengguna dapat menyesuaikan jumlahnya secara fleksibel sesuai dengan keperluan eksperimen. Potongan gDNA bersaiz besar dapat diperoleh dengan hasil yang tinggi.

DNA genom diekstrak dari jumlah sampel darah keseluruhan manusia yang berbeza oleh TIANamp Blood DNA Kit. Hasilnya adalah seperti berikut. Hasilnya disenaraikan sebagai rujukan sahaja, hasil pengekstrakan sebenarnya bergantung pada keadaan sampel.

Pengekstrakan DNA bekuan darah dapat dilakukan dengan menggunakan reagen yang disediakan dalam kedua kit ini dengan hanya mengubah protokol ke instruksi khusus untuk pengambilan DNA bekuan darah. Salinan lunak protokol pengekstrakan DNA bekuan darah dapat dikeluarkan setelah diminta.

Gantungkan sampel segar dengan 1 ml PBS, garam biasa atau penyangga TE. Homogenisasi sampel sepenuhnya dengan homogenizer dan kumpulkan endapan ke bahagian bawah tiub dengan menyentrifugasi. Buangkan supernatan, dan masukkan kembali endapan dengan 200 μl buffer GA. Pemurnian DNA berikut dapat dilakukan mengikut arahan.

Untuk pemurnian gDNA dalam sampel plasma, serum dan cecair badan, TIANamp Micro DNA Kit disyorkan. Untuk pemurnian virus gDNA dari sampel serum / plasma, TIANamp Virus DNA / RNA Kit disyorkan. Untuk pemurnian gDNA bakteria dari sampel serum dan plasma, Kit DNA TIANamp Bacteria disyorkan (lysozyme harus disertakan untuk bakteria positif). Untuk sampel air liur, disyorkan Hi-Swab DNA Kit dan TIANamp Bacteria DNA Kit.

DNAsecure Plant Kit atau DNAquick Plant System disyorkan untuk pengambilan genom kulat. Untuk pengekstrakan genom ragi, TIANamp Yeast DNA Kit disyorkan (litikase harus disediakan sendiri).